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          技術(shù)文章

          猴三葉因子3ELISA檢測試劑盒操作步驟
          點擊次數(shù):826 更新時間:2021-12-14

          猴三葉因子3ELISA檢測試劑盒操作步驟:


          . 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔0孔,在di一、第二孔中分別加標準品00μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。

          2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

          4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

          6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

          7. 溫育:操作同3。

          8. 洗滌:操作同5。

          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.

          0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

          . 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘。

          Attractin蛋白抗體

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          磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體

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          酸敏感離子通道抗體

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          髓系、淋巴、混合系白血病易位基因0抗體

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          溶血磷脂?;D(zhuǎn)移酶抗體

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          磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

          ?;摎涿负荛L鏈抗體

          信號轉(zhuǎn)導銜接結(jié)合蛋白抗體

          錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體

          有絲分裂激酶B抗體

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          磷酸化Ack抗體

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