當(dāng)前位置：PCR檢測試劑盒的具體使用步驟您都了解嗎？
點(diǎn)擊次數(shù)：867 更新時間：2021-11-25
PCR檢測試劑盒中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分，如：引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等，PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測樣品，即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷，陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
PCR檢測試劑盒的具體使用步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
.滴加0.0mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.0mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.0mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
PCR檢測試劑盒的特點(diǎn)：
準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對照試驗(yàn)>000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對，結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至0ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。
