小鼠雌二醇受體ERELISA試劑盒用于檢測未知抗體的間接法：
.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至～0μg／ml，每孔加0.ml，4℃過夜。
 
2.次日洗滌3次。
 
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,一遍用DDW洗滌。
 
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃0～30分鐘。
 
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
 
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。