三日瘧原蟲(chóng)LAMP試劑盒檢測(cè)程序：

.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 00ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 20 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液0 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液00ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液00ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)5 分鐘。
8.  每孔加入00ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

操作步驟：

：樣品準(zhǔn)備：取毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清（貼壁和懸浮細(xì)胞都可以,*已培養(yǎng)48小時(shí)以上），在6000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無(wú)菌PBS重懸，在6000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無(wú)菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用00微升超純水重懸，置于00℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存到2個(gè)月。

2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：

待各組份融化后先瞬時(shí)離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照，測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌，戴，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。