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          技術(shù)文章

          西部馬腦脊髓炎病毒PCR進口試劑盒擴增產(chǎn)物在電泳分析
          點擊次數(shù):972 更新時間:2020-06-18

          西部馬腦脊髓炎病毒PCR進口試劑盒擴增產(chǎn)物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺

          )zuichang見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系而不是RT-PCR的反應體系

          3) 與反應起始時RNA的總量及純度有關

          4) 建議在試驗中加入對照RNA

          5) 一鏈的反應產(chǎn)物在進行PCR擴增時,在總的反應體系中的含量不要超過/0

          6) 建議用Oligo(dT)或隨機引物代替基因特異性引物(GSP)用于一鏈合成。由于RNA模板存在二級結(jié)構(gòu),如環(huán)狀結(jié)果,有可能導致GSP無法與模板退火;或SSⅡ反轉(zhuǎn)錄酶無法從此引物進行有效延伸。

          7) 目的mRNA中含有強的轉(zhuǎn)錄中止位點,可以試用以下方法解決:

          a. 將一鏈的反應溫度提高至50℃。

          b. 使用隨機六聚體代替Oligo(dT)進行一鏈反應。

           

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