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          技術文章

          Hcy Elisa試劑盒結(jié)合物的稀釋液
          點擊次數(shù):1046 更新時間:2018-01-05

          Hcy Elisa試劑盒用于稀釋高濃度的結(jié)合物以配成工作液。為避免結(jié)合物在反應中直接吸附在固相載體上,在稀釋緩沖液中常加入高濃度的無關蛋白質(zhì)(例如%牛血清白蛋白),通過競爭以抑制結(jié)合物的吸附。一般還加入具有抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20,0.05%的濃度較為適宜。在間接測定抗體時,血清標本需稀釋后進行測定,也可應用這種稀釋液。
          酶標抗體中的酶和抗體均為生物活性物質(zhì),保存不當,極易失活。高濃度的結(jié)合物較為穩(wěn)定,冰凍干燥后可在普通冰箱中保存一年左右,但凍干過程中引起活力的減低,而且使用時需經(jīng)復溶,頗為不便。結(jié)合物溶液中加入等體積的甘油可在低溫冰箱或普通冰箱的冰格中較長時間保存。早期的ELISA試劑盒中的結(jié)合物一般均按以上兩種形式供應,配以稀釋液(見3.2.5)臨用時按標明的稀釋度稀釋成工作液。現(xiàn)在較先進的ELISA試劑盒均已用合適的緩沖液配成工作液,使用時不需再行稀釋,在4-8℃保存期可達6個月。由于蛋白質(zhì)濃度較低,結(jié)合物易失活,需加入蛋白保護劑。另外再加入抗生素(例如)和防腐劑(HRP結(jié)合物加硫柳泵,AP結(jié)合物可加疊氮鈉),以防止細菌生長。
          結(jié)合物制得后,在用作ELISA試劑前尚需確定其適當?shù)墓ぷ鳚舛?。使用過濃的結(jié)合物,既不經(jīng)濟,又可使本底增高;結(jié)合物的濃度過低,則又影響檢測的敏感性。所以必須對結(jié)合物的濃度予以選擇。zui適的工作濃度就是指結(jié)合物稀釋至這一濃度時,能維護一個低的本底,并獲得測定的靈敏度,達到zui合適的測定條件和測定費用的節(jié)省。就酶標抗體本身而言,它的有效工作濃度是指與其相應抗原包被的載體作試驗時,能得到陽性反應的稀釋度。例如某一HRP:抗人IgG制劑標明的工作濃度為:5000,表示該制劑經(jīng):5000稀釋后,Hcy Elisa試劑盒在與人IgG包被的固相作ELISA試驗時,將發(fā)生陽性反應。但在用于具體的ELISA檢測中,酶標抗體的zui適工作濃度受到固相載體的性質(zhì)、包被抗原或抗體的純度以及整個檢測系統(tǒng)如標本、反應溫度和時間等的影響,因此必須在實際測定條件下進行"滴配"選擇能達到高敏感度的稀釋度作為試劑盒中的工作濃度。
          300mg    --5     辛酸甲酯標準品    Methyl Caprylate 
          300mg    24-0-7     肉豆蔻酸甲酯標準品    Methyl Myristate 
          300mg    2-39-0     棕櫚酸甲酯標準品    Methyl Palmitate 
          300mg    20-25-8     棕櫚油酸甲酯標準品    Methyl Palmitoleate 
          300mg    2-6-8     十八酸甲酯標準品    Methyl Stearate 
          300mg    59467-70-8     標準品    Midazolam CIV
          300mg    9964-02-5     昂丹司瓊標準品    Ondansetron 
          300mg    03639-04-9     對照品標準品    Ondansetron Hydrochloride
          Hcy Elisa試劑盒

           

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