在完成BEL-7402人肝癌細胞的復(fù)蘇和傳代后，下一步需進行細胞培養(yǎng)的日常觀察與換液操作。首先，將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下，觀察細胞的生長狀態(tài)及密度。健康的BEL-7402細胞通常呈多邊形或梭形，貼壁生長，若發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)異常(如變圓、脫落或出現(xiàn)空泡)，可能提示污染或培養(yǎng)條件不佳，需及時處理。
 

　　當細胞密度達到80%-90%時，即可進行換液。換液前需預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清的DMEM)至37℃，隨后在超凈工作臺中棄去舊培養(yǎng)基，用預(yù)熱的PBS輕柔洗滌細胞2次，以去除代謝廢物和死細胞。注意避免直接沖擊細胞層，防止細胞脫落。洗滌后，加入新鮮培養(yǎng)基，體積以覆蓋瓶底為宜(如T25培養(yǎng)瓶加入5-6mL)。
 

　　若需進行后續(xù)實驗(如藥物處理或轉(zhuǎn)染)，建議在換液后24小時內(nèi)操作，此時細胞處于對數(shù)生長期，狀態(tài)最佳。對于長期培養(yǎng)，需每隔2-3天換液一次，并定期傳代以維持細胞活性。每次操作后，需詳細記錄細胞狀態(tài)、傳代次數(shù)及實驗條件，以確保實驗可重復(fù)性。